高壓處理后通過PMAxx-RT-qPCR技術(shù)測定牡蠣中人類諾如病毒的滅活
發(fā)布時間：2024-11-11 瀏覽次數(shù)：232
本文將探討如何運用PMAxx-RT-qPCR技術(shù)評估高壓處理對牡蠣中人諾如病毒的滅活效果。
PMAxx-RT-qPCR：病毒檢測的革新利器
PMAxx-RT-qPCR技術(shù)是一種先進的病毒檢測方法，它通過結(jié)合光誘導(dǎo)交聯(lián)劑PMAxx與實時定量PCR技術(shù)，實現(xiàn)了對活病毒與死病毒的精準區(qū)分。在檢測過程中，PMAxx能夠特異性結(jié)合死細胞中的DNA，從而在PCR擴增前消除其干擾，確保了檢測結(jié)果的準確性。
高壓處理：滅活病毒的新途徑
高壓處理，即通過施加極高的壓力（通常為400-600MPa）于食品上，能夠在不破壞食品營養(yǎng)價值和口感的前提下，有效滅活其中的細菌、病毒等微生物。針對牡蠣中的人諾如病毒，高壓處理的滅活效果尤為顯著，為食品安全提供了新的保障。
實驗設(shè)計與數(shù)據(jù)分析
在這項研究中，研究人員使用PMAxx?（一種光反應(yīng)性DNA結(jié)合染料）處理，結(jié)合RT-qPCR技術(shù)，來評估高壓處理后牡蠣中諾如病毒基因組I和II群（GI和GII）的病毒衣殼完整性。研究使用了生物積累的諾如病毒GI.3和GII.4牡蠣，將它們暴露于300和450 MPa的壓力下，在15℃和20℃的溫度條件下進行處理。然后，使用RT-qPCR和PMAxx-RT-qPCR對樣本進行分析。通過計算RT-qPCR測定的諾如病毒濃度（基因組拷貝數(shù)/克消化組織）與PMAxx-RT-qPCR濃度的比值，得出相對非完整（Relative Non-Intact, RNI）比率。RNI比率值反映了非完整（非感染性）病毒與完整（可能感染性）病毒的數(shù)量關(guān)系。
圖1 牡蠣樣品在300 MPa、20°C條件下的諾如病毒GII相對不完整(RNI)比值值。
研究發(fā)現(xiàn)，隨著壓力的增加和溫度的降低，RNI比率值增加，表明病毒完整性降低。在300 MPa的壓力下，GI型諾如病毒的中位數(shù)RNI比率值在15℃時為2.6，而在20℃時為1.1。在450 MPa的壓力下，15℃時的RNI比率值為5.5，而在20℃時為1.3。在600 MPa的壓力下，20℃時的RNI比率值為5.1。對于GII型諾如病毒，RT-qPCR和PMAxx-RT-qPCR的檢測在450和600 MPa的壓力下顯著降低。
結(jié)果與討論
實驗結(jié)果顯示，經(jīng)過高壓處理的牡蠣，其人諾如病毒含量下降了至少3個對數(shù)級，這意味著高壓處理能夠顯著降低牡蠣攜帶人諾如病毒的風險。這一發(fā)現(xiàn)不僅為牡蠣等貝類食品的病毒污染控制提供了新的解決方案，也為高壓處理技術(shù)在食品加工領(lǐng)域的應(yīng)用提供了強有力的科學支持。
結(jié)語：科技助力食品安全
PMAxx-RT-qPCR技術(shù)在高壓處理牡蠣滅活人諾如病毒中的應(yīng)用，展現(xiàn)了科技在食品安全領(lǐng)域的巨大潛力，為食品安全領(lǐng)域帶來了革命性的突破。這一研究不僅為食品加工提供了新的視角，也為消費者健康保駕護航提供了有力的科學依據(jù)。通過精準檢測與有效滅活，我們能夠更好地保障消費者健康，推動食品行業(yè)的持續(xù)健康發(fā)展。未來，隨著科技的不斷進步，我們有理由相信，食品安全將得到更加全面和有效的保障。
參考文獻：Rachmadi A T, Gyawali P, Summers G, et al. PMAxx-RT-qPCR to Determine Human Norovirus Inactivation Following High-Pressure Processing of Oysters[J]. Food and Environmental Virology, 2024: 1-9.
來源：微生物安全與健康網(wǎng)，作者~陳富。
