021011 玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基
(Rose Bengal AgarⅡ)
用 途:
玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基用于供藥品和生物制品中霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù)、分離和培養(yǎng)用。(《中華人民共和國藥典》2010年版)
原 理:
胨提供碳源和氮源;葡萄糖提供能源;磷酸二氫鉀為緩沖劑;硫酸鎂提供必須的微量元素;玫瑰紅鈉作為選擇性抑菌劑可抑制細(xì)菌的生長,并可減緩某些霉菌因生長過快而導(dǎo)致菌落漫延生長;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。
玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基配方(每升):
胨 5.0g
葡萄糖 10.0g
磷酸二氫鉀 1.0g
硫酸鎂 0.5g
玫瑰紅鈉 0.0133g
瓊脂 14.0g
最終pH 6.0±0.2
使用方法(計(jì)數(shù)用法):
1、稱取本品30.5g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌20min。
2、檢樣的稀釋處理,略。
3、根據(jù)對樣品污染情況的估計(jì),選擇3個合適的稀釋度,分別在做10倍稀釋的同時,吸取1.0mL稀釋液于滅菌平皿中,每個稀釋度做2~3個平皿。
4、將涼至45℃左右的培養(yǎng)基約15mL注入平皿中,待瓊脂凝固后,倒置于23~28℃溫箱中培養(yǎng)72h,對于菌落微小點(diǎn)計(jì)困難的平板可延續(xù)培養(yǎng)到4~5d再進(jìn)行觀察計(jì)數(shù)。
5、計(jì)數(shù)、報(bào)告:
(1) 計(jì)數(shù):一般情況下,玫瑰紅鈉平板計(jì)點(diǎn)霉菌或酵母菌數(shù),如在該平板上生長的細(xì)菌菌落數(shù)多于營養(yǎng)瓊脂平板上生長的菌落數(shù)時,則應(yīng)同時點(diǎn)計(jì)細(xì)菌數(shù),并將該菌數(shù)作為供試品的細(xì)菌數(shù)報(bào)告。固體供試品在玫瑰紅鈉瓊脂平板上點(diǎn)計(jì)霉菌落數(shù),液體供試品則需在玫瑰紅鈉瓊脂平板上點(diǎn)計(jì)霉菌與酵母菌菌數(shù);含蜂蜜及王漿的合劑需以玫瑰紅鈉平板的霉菌菌落數(shù)加上酵母膏粉胨葡萄糖瓊脂平板的酵母菌菌落數(shù)作為供試品的霉菌、酵母菌總數(shù)。
(2) 報(bào)告:通常選擇菌落數(shù)在30~100之間的稀釋級的平板計(jì)數(shù),以該稀釋度的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告。
質(zhì)量控制:
本品傾注平皿后呈玫瑰紅色,下列菌株接種后23~28℃培養(yǎng)72h生長情況如下表。
貯 存:貯存于避光、陰涼干燥處,用后立即旋緊瓶蓋。貯存期三年。
規(guī) 格:250g
參考文獻(xiàn):
1. 《中華人民共和國藥典》2010年版,附錄XI J 微生物限度檢查。