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13種不同的HEK293細胞你知道嗎?你用的是哪種HEK293細胞?

發(fā)布時間:2025-03-07    瀏覽次數(shù):240

人胚胎腎細胞系(HEK293)是通過用5型腺病毒(Ad5)DNA的剪切片段轉(zhuǎn)化人胚胎腎(HEK)細胞使其永生化而產(chǎn)生的。據(jù)研究,Ad5基因組左臂的17% 基因被整合到轉(zhuǎn)化的HEK細胞的19號染色體中。自創(chuàng)建以來,該細胞系已得到廣泛表征,并開發(fā)了許多具有獨特特性的衍生細胞系。這些細胞系包括HEK293T、HEK293E(EBNA)、HEK293-6E、HEK293F及其衍生物 HEK293FT和HEK293FTM、HEK293S和HEK293H,更多衍生的細胞系還有HEK293SG、HEK293SGGD(Glycodelete)、HEK293A、HEK293MSR等。

那么你都知道這些HEK293細胞的來源和特征嗎?有什么區(qū)別?你用的又是哪種呢?

(1)HEK293細胞。HEK293是用5型腺病毒(Ad5)的E1A基因轉(zhuǎn)化人胚胎腎細胞從而永生化的。該細胞比較容易轉(zhuǎn)染,常用于外源基因的表達研究。HEK293細胞的缺點是貼壁性比較低,在實驗過程中很容易丟失一些陽性細胞從而影響實驗結(jié)果。

HEK293細胞

(2)HEK293S細胞。HEK293S適用于懸浮液生長,其后綴S的意思是Suspension,其可在改良的最小 Eagle培養(yǎng)基中懸浮生長。

HEK293S細胞

(3)HEK293T細胞。HEK293T是用編碼SV40 大T抗原的溫度敏感突變體的質(zhì)粒穩(wěn)定轉(zhuǎn)染HEK293細胞系改造而來的。HEK293T可用于擴增含有 SV40 ori 的載體,能顯著提高瞬時轉(zhuǎn)染過程中的蛋白表達水平。該細胞的轉(zhuǎn)染效率比HEK293更高,因此現(xiàn)在更多使用的HEK293T。

(4)HEK293FT細胞。HEK293FT是HEK293T的快速生長突變體。其表達來自 pCMVSPORT6TAg.neo 質(zhì)粒的 SV40 大 T 抗原。HEK293FT專為慢病毒生產(chǎn)而設(shè)計。

(5)HEK293F細胞。HEK293F是從HEK293 細胞系克隆而來,并適應(yīng)商業(yè)化培養(yǎng)基。其特征是生長快,轉(zhuǎn)染率高。在化學(xué)成分確定的培養(yǎng)基中生長。

(6)HEK293H細胞。HEK293H是從HEK293克隆而來,以選擇在噬斑測定過程中具有良好粘附性的克隆。后來適應(yīng)了在無血清培養(yǎng)基(SFM)(GIBCO 293H) 中生長。其在SFM中生長快,噬菌斑檢測粘附性好,轉(zhuǎn)染效率高,蛋白表達水平高。

(7)HEK293E(EBNA)細胞。HEK293E(EBNA)表達 EBNA-1 蛋白,用于攜帶 oriP 質(zhì)粒的游離型復(fù)制。其可擴增含有 oriP 的載體,顯著提高瞬時轉(zhuǎn)染過程中的蛋白表達水平。

(8)HEK293-6E細胞。HEK293-6E轉(zhuǎn)染了EBNA1t ,EBNA1t是EBV EBNA1 的截短版本,缺乏 Gly-Gly-Ala 重復(fù)區(qū)。與HEK293-EBNA相比,HEK293-6E具有更強的重組蛋白生產(chǎn)能力。

(9)HEK293FTM細胞。HEK293FTM是通過在293細胞中穩(wěn)定轉(zhuǎn)染含有質(zhì)粒的 FRT 位點和 TetR 表達質(zhì)粒而來。通過共轉(zhuǎn)染含有目標基因的 Flp-InTM 表達載體和 Flp 重組酶表達載體,用于快速、輕松地生成穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細胞庫。

(10)HEK293SG細胞。HEK293SG是通過用甲磺酸乙酯(EMS)篩選的HEK293S衍生的具有蓖麻毒素抗毒素的克隆。缺乏N-乙酰葡糖胺基轉(zhuǎn)移酶 I 活性(由 MGAT1 基因編碼),因此主要用 Man5GlcNAc2 N-聚糖修飾糖蛋白。HEK293SG 用于生產(chǎn)均相 N-糖基化蛋白。

(11)HEK293SGGD(Glycodelete)細胞。HEK293SGGD(Glycodelete)來源于293SG,表達高爾基體靶向形式的endoT,endoT 是一種來自真菌里氏木霉的內(nèi)切糖苷酶。HEK293SGGD 主要用于生產(chǎn)用于糖基化研究和結(jié)構(gòu)分析的蛋白質(zhì)。

(12)HEK293A細胞。HEK293A是具有相對平坦形態(tài)的HEK293細胞的亞克隆。其后綴A的意思是Adhere,HEK293A的貼壁性要強于HEK293細胞,且更容易形成單層細胞,不會存在細胞重疊和細胞間隙的情況,因此常用于病毒的空斑試驗。HEK293A能促進復(fù)制缺陷腺病毒的初始生產(chǎn)、擴增和滴度測定。

(13)HEK293MSR細胞。HEK293MSR是由HEK293基因工程改造而來,用于表達人巨噬細胞清道夫受體。HEK293MSR可以牢固粘附于標準組織培養(yǎng)板,從而能夠獲得可靠的實驗結(jié)果。

環(huán)凱細胞培養(yǎng)基

文章來源:環(huán)凱轉(zhuǎn)載于“ 智者不學(xué)生物”公眾號;原標題:“13種不同的HEK293細胞你知道嗎?你用的是哪種HEK293細胞?”;作者~腌制油梨。
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