中國工程院食品安全院士團隊

科研成果轉化平臺

我公司針對目前乳制品行業(yè)及質(zhì)量監(jiān)測單位檢驗阪崎腸桿菌的需求及情況，對阪崎腸桿菌檢驗相應的技術改進，使得阪崎腸桿菌檢出率較之前有很大的改進。擴充并完善了相關的微生物檢測試劑，使得技術操作人員能更準確、快捷的檢測出目標菌。

方案一：傳統(tǒng)微生物檢測法 

       依據(jù)GB 4789.40-2016食品衛(wèi)生微生物學檢驗克羅諾桿菌屬（阪崎腸桿菌）檢驗，推出成套的阪崎腸桿菌檢驗解決方案，為生產(chǎn)企業(yè)及檢驗單位提供方便。 

第一法 克羅諾桿菌屬定性檢驗 操作步驟 

1.1 前增菌和增菌 取檢樣100 g（mL）加入已預熱至44 ℃裝有900 mL 緩沖蛋白胨水的錐形瓶中，用手緩緩地搖動至充分溶解，36 ℃±1 ℃培養(yǎng)18 h±2 h。移取1 mL 轉種于10 mL mLST-Vm 肉湯，44 ℃±0.5 ℃培養(yǎng)24 h±2h。 

1.2 分離 1.2.1 輕輕混勻mLST-Vm 肉湯培養(yǎng)物，各取增菌培養(yǎng)物1 環(huán)，分別劃線接種于兩個阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基平板，36 ℃±1 ℃培養(yǎng)24 h±2 h。 1.2.2 挑取至少5個可疑菌落，劃線接種于TSA 平板。25 ℃±1 ℃培養(yǎng)48 h±4 h。 

1.3 鑒定 自TSA 平板上直接挑取黃色可疑菌落，進行生化鑒定?？肆_諾桿菌屬的主要生化特征見表2?？蛇x擇生化鑒定試劑盒或全自動微生物生化鑒定系統(tǒng)。

克羅諾桿菌屬的主要生化特征 

1.4 結果與報告 綜合菌落形態(tài)和生化特征，報告每100 g（mL）樣品中檢出或未檢出克羅諾桿菌屬。 

第二法 克羅諾桿菌屬的計數(shù) 操作步驟 

2.1 樣品的稀釋 2.1.1 固體和半固體樣品：無菌稱取樣品100 g、10 g、1 g 各三份，加入已預熱至44 ℃分別盛有900 mL、90 mL、9 mL BPW 中，輕輕振搖使充分溶解，制成1:10 樣品勻液，置36 ℃±1 ℃培養(yǎng)18 h±2 h。分別移取1 mL 轉種于10 mL mLST-Vm 肉湯，44 ℃±0.5 ℃培養(yǎng)24 h±2 h。 2.1.2 液體樣品：以無菌吸管分別取樣品100 mL、10 mL、1 mL 各三份，加入已預熱至44 ℃分別盛有900 mL、90 mL、9 mL BPW 中，輕輕振搖使充分混勻，制成1:10 樣品勻液，置36 ℃±1 ℃培養(yǎng)18h±2h。分別移取1 mL 轉種于10 mL mLST-Vm 肉湯，44 ℃±0.5 ℃培養(yǎng)24 h±2 h。 

2.2 分離、鑒定 同1.2，1.3。 

2.3 結果與報告 綜合菌落形態(tài)、生化特征，根據(jù)證實為克羅諾桿菌屬的陽性管數(shù)，查MPN 檢索表，報告每100 g（mL）樣品中克羅諾桿菌屬的MPN 值（見國標附錄Ｂ中表B.1）。 

實驗操作所用培養(yǎng)基及生化試劑

不同培養(yǎng)基下菌種顯現(xiàn)出不同的菌落形態(tài)（菌株：阪崎腸桿菌 ATCC29544） 

                  培養(yǎng)基：TSA                                 培養(yǎng)基：阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基DFI

方案二：恒溫熒光快速檢測法 

基于核酸水平的快速檢測技術目前日臻發(fā)展成熟，不少分子檢測技術已經(jīng)寫入標準當中，比如PCR、LAMP技術；我司推出基于恒溫熒光檢測技術的微生物快速試劑盒，可用于食源性致病菌，包括阪崎腸桿菌。該試劑盒無需常規(guī)PCR中變性、退火、延伸等步驟不同溫度設計要求，只需提供一個適宜的恒定溫度即可。 因此，與常規(guī)PCR相比，恒溫熒光檢測技術更適合現(xiàn)場高通量快速檢測，具有簡單、快速、特異性強的特點。 

操作流程圖 

所需試劑、儀器及耗材列表

產(chǎn)品信息1、阪崎腸桿菌核酸檢測試劑盒（恒溫熒光法）試劑盒組成 

產(chǎn)品信息2、 

產(chǎn)品信息3、