中國工程院食品安全院士團隊

科研成果轉化平臺

　 【產品名稱】

    阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基

　　(Chromogenic Enterbacter Sakazakii Agar)

　 【產品用途】

　　阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基供嬰兒奶粉以及其它食品中阪崎腸桿菌的鑒定和計數。(GB4789.40-2010和SN/T 1632-2005，ISO標準)

　 【檢驗原理】

　　蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、維生素、氨基酸和碳源;膽鹽抑制革蘭氏陽性菌，氯化鈉可維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑;硫代硫酸鈉和檸檬酸鐵銨用于檢測硫化氫的產生;顯色底物5-溴-4-氯-3-吲哚-ɑ-D 葡萄糖苷與阪崎腸桿菌中的α-葡萄糖苷酶發(fā)生反應，水解底物，釋放出5-溴-4-氯-3-吲哚基顯色基團，在淡黃色平板上產生綠-藍綠色的菌落。

  【配方】

　　阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基配方(每升)：

　　蛋白胨                  11g

　　牛肉膏粉                 5g

　　氯化鈉                   5g

　　檸檬酸鐵銨 　            1g

　　硫代硫酸鈉               1g

　　膽鹽                    1.5g

　　5-溴-4-氯-3-吲哚-ɑ-D 葡萄糖苷 0.1g

　　瓊脂                    15g

　　最終pH                7.3±0.2

　 【使用方法】

　　1. 取瓶內阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基干粉39.6克，加入蒸餾水或去離子水1 L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝三角瓶，121℃高壓滅菌15min;冷卻至50℃，搖勻倒平板。在室溫可保存一天或在冰箱里貯存數天(避光，4℃)。

　　2. 取樣品333克按MPN三管法分別取100克、10克和1克分裝在各三個2000ml、250ml和100ml的三角瓶中，在三角瓶中已裝有經45℃預熱的9/10(樣品為1/10)的無菌蒸餾水或緩沖蛋白胨水，搖勻，在36℃培養(yǎng)18-22小時(SN和FDA方法)。

　　3. 各取10ml上述懸浮液加到裝有90mlEE肉湯(022160)/mLST-Vm(022212)的150mL的三角瓶中，在36℃/44℃增菌培養(yǎng)18-22小時。

　　4. 用劃線或涂布法把混勻的肉湯接種到阪崎腸桿菌顯色瓊脂平板上，35-37℃培養(yǎng)18-24小時。

　　5. 可使用MicrogenTMGN-ID或API20E或生化管試驗，對疑似阪崎腸桿菌菌落進行生化鑒定。

　 【質量控制】

    阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基質量控制：

　　本品傾注平皿后呈淡黃色，下列菌株接種后36±1℃培養(yǎng)18-24小時生長情況如下表:

　　貯 存：貯存于避光、陰涼干燥處，用后立即旋緊瓶蓋。貯存期二年。

　　規(guī) 格：可配置1L的培養(yǎng)基干粉。