產(chǎn)品名稱：MMO-MUG酶底物法培養(yǎng)基（Minimal Medium ONPG-MUG Medium）
產(chǎn)品編號與包裝規(guī)格：
| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品類型 | 包裝規(guī)格 |
|---|---|---|
| DW001 | 酶底物檢測系統(tǒng)配套培養(yǎng)基 | 100袋/盒（輻照滅菌） |
產(chǎn)品用途：用于酶底物法測定水中總大腸菌群、糞大腸菌群和大腸埃希氏菌。
檢驗原理：硫酸銨、硫酸鎂、硫酸錳、硫酸鋅、氯化鈣、亞硫酸鈉提供氮源、生長因子；氯化鈉用于維持胞滲透壓；兩性霉素B可抑制真菌的生長；ONPG和MUG為酶顯色底物；HEPES及HEPES鈉鹽為酸堿緩沖劑.
Minimal Medium ONPG-MUG培養(yǎng)基配方成分：
| 配方 | 含量（/L） |
|---|---|
| 硫酸銨 | 5g |
| 硫酸錳 | 0.5mg |
| 硫酸鋅 | 0.5mg |
| 硫酸鎂 | 100mg |
| 氯化鈉 | 10g |
| 氯化鈣 | 50mg |
| 亞硫酸鈉 | 40mg |
| 兩性霉素B | 1mg |
| ONPG | 500mg |
| MUG | 75mg |
| 茄屬植物萃取物 | 500mg |
| HEPES鈉鹽 | 5.3g |
| HEPES | 6.9g |
MMO-MUG酶底物法培養(yǎng)基（Minimal Medium ONPG-MUG培養(yǎng)基）使用方法【應(yīng)用場景】：
定量操作
 |  |
將MMO-MUG培養(yǎng)基加入到100mL水樣中，混合均勻。 | 倒入51/97孔定量盤，無需稀釋。 |
 |  |
在程控定量封口機(jī)上封口后，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時。 | 結(jié)果讀取。 |
1
無顏色變化：陰性
2
如果是36±1℃培養(yǎng)24小時：黃色孔格數(shù)對照MPN表得到總大腸菌群檢測結(jié)果；黃色且熒光的孔格數(shù)對照MPN表得到大腸埃希氏菌檢測結(jié)果
3
如果是44.5°C培養(yǎng)24小時：黃色孔格數(shù)對照MPN表得到耐熱大腸菌群檢測結(jié)果
定性操作
將100mL水樣加入100mL無菌取樣瓶中，向瓶中加入環(huán)凱的MMO-MUG培養(yǎng)基，輕搖瓶子確保培養(yǎng)基完全溶解后，放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24h。
 將100mL水樣加入100mL無菌取樣瓶。 |  加入MMO-MUG培養(yǎng)基，搖晃至溶解。 |
 置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時。 |
1
無顏色變化：陰性
2
顏色變黃：總大腸菌群陽性
3
顏色變黃且觀察到熒光(使用366nm紫外燈照射顯黃色的取樣瓶，呈現(xiàn)明顯熒光)：大腸埃希氏菌陽性
10管法操作
《GB5750.12-2023》酶底物法中對10管法的操作描述如下：
將100mL水樣加入100mL無菌取樣瓶中，向瓶中加入環(huán)凱的MMO-MUG培養(yǎng)基，輕搖瓶子確保培養(yǎng)基完全溶解；
準(zhǔn)備10支無菌試管，用無菌吸管從上述水樣瓶中分別吸取10mL水樣至各試管中，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。
 將MMO-MUG培養(yǎng)基加入100mL水樣中，搖晃至溶解 |  混勻后，將混合液體各取10mL分裝到試管中，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng) |
 培養(yǎng)24h，查看試管顏色，如變黃為總大腸菌群的陽性檢測結(jié)果 |  同時使用366nm紫外燈照射顯黃色的管數(shù)，看是否觀察到熒光 |
1
如果是36±1℃培養(yǎng)24小時：
黃色管數(shù)對照MPN表得到總大腸菌群檢測結(jié)果；結(jié)果讀?。狐S色且熒光的管數(shù)對照MPN表得到大腸埃希氏菌檢測結(jié)果；
2
如果是44.5℃培養(yǎng)24小時：黃色管數(shù)對照MPN表得到耐熱大腸菌群檢測結(jié)果。
請查閱GB5750.12-2023酶底物法10管法MPN表獲取檢測結(jié)果。
參考文獻(xiàn)：
HJ 1001-2018 中華人民共和國國家環(huán)境保護(hù)標(biāo)準(zhǔn) 水質(zhì) 總大腸菌群、糞大腸菌群和大腸埃希氏菌的測定 酶底物法
GB/T 5750.12-2006 生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法 微生物指標(biāo)
