中國(guó)工程院食品安全院士團(tuán)隊(duì)

科研成果轉(zhuǎn)化平臺(tái)

銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa, PA）作為一種常見(jiàn)的機(jī)會(huì)致病菌，在醫(yī)療、環(huán)境及公共衛(wèi)生領(lǐng)域均構(gòu)成顯著威脅。免疫學(xué)檢測(cè)作為其中一類(lèi)高效手段，通過(guò)特異性抗體與細(xì)菌抗原的相互作用，為銅綠假單胞菌的識(shí)別與診斷提供了有力支持。

在免疫學(xué)檢測(cè)中，多種技術(shù)被應(yīng)用于銅綠假單胞菌的檢測(cè)，其中最為常見(jiàn)和成熟的是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。ELISA技術(shù)利用酶的高效催化作用，將抗原抗體反應(yīng)與酶促反應(yīng)相結(jié)合，通過(guò)顯色反應(yīng)直觀地反映出樣本中目標(biāo)物質(zhì)的含量，包括：雙抗夾心法、雙位點(diǎn)一步法、間接法。這種技術(shù)不僅操作簡(jiǎn)便、結(jié)果可靠，而且具有較高的靈敏度和特異性，能夠準(zhǔn)確識(shí)別出微量的銅綠假單胞菌抗原或抗體。除了ELISA外，免疫熒光技術(shù)、免疫印跡法以及流式細(xì)胞術(shù)等也被用于銅綠假單胞菌的免疫學(xué)檢測(cè)。免疫熒光法是將用熒光素釋放劑或染色劑標(biāo)記的抗體或抗原分子與細(xì)菌的特異性蛋白結(jié)合，通過(guò)光譜分析器檢測(cè)出熒光，從而完成檢測(cè)和細(xì)胞定位。酶聯(lián)免疫電轉(zhuǎn)移印斑法是根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合檢測(cè)復(fù)雜樣品中的某種蛋白的方法，該法是在凝膠電泳和固相免疫測(cè)定技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種新的免疫生化技術(shù)。流式細(xì)胞術(shù)則結(jié)合了免疫學(xué)和細(xì)胞學(xué)的優(yōu)勢(shì)，能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)PA的快速、高通量檢測(cè)。1988年，Shand等制備了PA標(biāo)準(zhǔn)抗原(St-Ag)，并用IBT和交叉免疫電泳法(CIE)檢測(cè)CF患者血清中的PA抗體，可用于診斷PA引起CF患者的肺部感染。PA的毒力因子、鞭毛抗原、脂多糖都可以作為抗原進(jìn)行檢測(cè)。1988年，George等提取一種針對(duì)所有PA的鼠類(lèi)單抗，并與異硫氰酸熒光素偶聯(lián)，分別檢測(cè)了21份陽(yáng)性樣品和103份陰性樣品，對(duì)PA達(dá)到了100%的敏感性和特異性，可以用于血培養(yǎng)中PA的快速鑒定。近些年來(lái)，熒光量子點(diǎn)、納米團(tuán)簇、熒光稀土配合物等，具有高熒光效率、持久熒光特性的納米材料的發(fā)展為IFA帶來(lái)了新的方向。

銅綠假單胞菌免疫學(xué)檢測(cè)的優(yōu)勢(shì)在于其高特異性、高靈敏度以及快速性。它能夠在較短時(shí)間內(nèi)提供準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果，為臨床診斷和治療提供有力支持。同時(shí)，該方法還適用于大規(guī)模篩查和流行病學(xué)調(diào)查，有助于及時(shí)發(fā)現(xiàn)和控制銅綠假單胞菌的傳播。

原文DOI: 10.1039/c7ra09064a.

來(lái)源：微生物安全與健康網(wǎng)，作者~鄭曉崢。