腸道中空腸彎曲菌的一種新型檢測方法
發(fā)布時間：2024-08-27 瀏覽次數(shù)：41
當(dāng)你肚子不舒服時，可能會想著忍一會就過去了，如果忍不住了再去醫(yī)院看看?？赡闶欠裣脒^到底是什么原因、什么菌類、什么病毒引起的呢？本文就是在闡述一種腸道中人類腹瀉最常見的病原菌之一—空腸彎曲菌的一種新型檢測方法。
首先我們來介紹一下空腸彎曲菌，它的英文名為Campylobacter jejuni，菌體輕度彎曲似逗點狀，長1.5～5μm，寬0.2～0.8μm。菌體的一端或兩端有單鞭毛，運動活潑，在暗視野鏡下觀察似飛蠅，無莢膜，不形成芽胞，微需氧菌，在含2.5%-5%氧氣或10%二氧化碳的環(huán)境中生長最好。最適生長溫度37℃-42℃?？漳c彎曲菌的抵抗力不強，易被干燥、直射日光及弱消毒劑所殺滅，對低溫敏感，室溫下(20℃-23℃)很快死亡，該菌有內(nèi)毒素能侵襲小腸和大腸黏膜引起急性腸炎，也可引起腹瀉的暴發(fā)流行或集體食物中毒。同時，空腸彎曲菌對紅霉素、新霉素、慶大霉素、四環(huán)素、氯霉素、卡那霉素等抗生素敏感。近年發(fā)現(xiàn)了不少耐藥菌株，及多重耐藥性菌株。由于空腸衣原體生長緩慢，傳統(tǒng)的培養(yǎng)檢測技術(shù)既費時又費力。此外，主要問題是假陰性結(jié)果和基于培養(yǎng)的方法的靈敏度不足。目前，基于核酸的分子技術(shù)，如PCR和qPCR(實時定量PCR)，用于檢測食源性病原體。然而，對復(fù)雜而昂貴的儀器的需求以及模板DNA的純度使它們無法廣泛用于常規(guī)檢測。
環(huán)介導(dǎo)的等溫擴增(LAMP)是一種創(chuàng)新技術(shù)，利用BstDNA聚合酶的自循環(huán)鏈置換行為，在等溫條件下擴增核酸，LAMP可以在任何加熱塊或恒溫干浴中輕松運行。其過程為：首先提取基因組DNA，然后進行燈底漆設(shè)計與燈測定，隨著進行聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，最后進行LAMP的測定。結(jié)果顯示LAMP可生產(chǎn)的DNA量比PCR高一倍，對抑制劑的敏感性相對較低。因此，LAMP可以成為檢測和鑒定食源性細菌病原體的快速而簡單的工具。
綜上所述，開發(fā)了一種靈敏、特異、快速、實用的空腸衣原體檢測LAMP方法，LAMP測定的另一個重要優(yōu)點是，可以根據(jù)白色沉淀物直接用肉眼判斷結(jié)果，從而提供與凝膠電泳數(shù)據(jù)一致的結(jié)果。總體而言，用于檢測空腸衣原體的LAMP技術(shù)在臨床、現(xiàn)場和資源匱乏的環(huán)境中是一種有價值的工具。
參考文獻：Ying Liu , Meidi Xu, Jiang Wang, Yang Cao , Tao Wang , Lan Mu , Chao Niu.Detection of Campylobacter jejuni Based on a Real-Time Fluorescence Loop-Mediated Isothermal Amplification Method，2022.8
來源：微生物安全與健康網(wǎng)，作者~王康
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