實戰(zhàn)分享 | 懸浮細胞THP-1培養(yǎng)經(jīng)驗
發(fā)布時間：2023-06-20 瀏覽次數(shù)：276
平常實驗室貼壁癌細胞養(yǎng)的比較多，針對懸浮細胞經(jīng)驗較少，經(jīng)過多方咨詢細胞方面的技術(shù)專家，也結(jié)合網(wǎng)上查詢的經(jīng)驗貼，來自武漢大學(xué)的任老師最終能熟練培養(yǎng)懸浮細胞，順利完成實驗，并將研究成果發(fā)表在Journal of Controlled Release雜志上，下文是任老師的一些經(jīng)驗分享。
培養(yǎng)條件 ……
THP-1細胞的培養(yǎng)條件是：RPMI1640培養(yǎng)基＋10% FBS＋0.05mM β-巰基乙醇＋1% 雙抗。
需要注意的是，THP-1細胞本身對血清比較敏感，所以我們采用的是價格比較貴的澳洲血清，培養(yǎng)基就是常用的RPMI1640培養(yǎng)基。
還有一點值得注意的是，這個細胞還需要添加β-巰基乙醇，β-巰基乙醇直接用的普諾賽細胞培養(yǎng)用的1000倍的儲備液，使用時直接稀釋1000倍加到培養(yǎng)基里就可以了。
培養(yǎng)方式 ……
一般我是采用透氣T25細胞培養(yǎng)瓶，剛開始細胞密度比較低的時候我會豎著靜置，瓶內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基，等個兩三天觀察一下細胞密度，如果細胞密度還可以就正常平放即可。
細胞傳代 ……
針對細胞傳代，有兩種方式：
1：2-3天可以采取半量換液法，即瓶內(nèi)有5ml培養(yǎng)基，加入5ml培養(yǎng)基混勻，取出5ml放入另一瓶中；
2：每周可以采取一次離心去除上清培養(yǎng)基，加入新鮮培養(yǎng)基，進行繼續(xù)培養(yǎng)，如果細胞不著急用，不需要每天拿出來觀察。同時也不需要每天換液，因為該細胞比較喜歡在酸性環(huán)境生長，因此待培養(yǎng)基變黃，再去換液或者傳代。
以上便是任老師培養(yǎng)懸浮細胞THP-1的全部經(jīng)驗分享，希望能對大家有所幫助。我們也歡迎更多老師來稿，分享您的科研干貨和心得體會！
說明：轉(zhuǎn)載僅為分享目的,部分文章圖片因轉(zhuǎn)載眾多無法確認原始作者的,僅標(biāo)明轉(zhuǎn)載來源;版權(quán)歸原作者所有,如有問題,請聯(lián)系小編刪除,謝謝！
