中國(guó)工程院食品安全院士團(tuán)隊(duì)

科研成果轉(zhuǎn)化平臺(tái)

平常實(shí)驗(yàn)室貼壁癌細(xì)胞養(yǎng)的比較多，針對(duì)懸浮細(xì)胞經(jīng)驗(yàn)較少，經(jīng)過(guò)多方咨詢細(xì)胞方面的技術(shù)專家，也結(jié)合網(wǎng)上查詢的經(jīng)驗(yàn)貼，來(lái)自武漢大學(xué)的任老師最終能熟練培養(yǎng)懸浮細(xì)胞，順利完成實(shí)驗(yàn)，并將研究成果發(fā)表在Journal of Controlled Release雜志上，下文是任老師的一些經(jīng)驗(yàn)分享。

培養(yǎng)條件 ^……

THP-1細(xì)胞的培養(yǎng)條件是：RPMI1640培養(yǎng)基＋10% FBS＋0.05mM β-巰基乙醇＋1% 雙抗。

需要注意的是，THP-1細(xì)胞本身對(duì)血清比較敏感，所以我們采用的是價(jià)格比較貴的澳洲血清，培養(yǎng)基就是常用的RPMI1640培養(yǎng)基。

還有一點(diǎn)值得注意的是，這個(gè)細(xì)胞還需要添加β-巰基乙醇，β-巰基乙醇直接用的普諾賽細(xì)胞培養(yǎng)用的1000倍的儲(chǔ)備液，使用時(shí)直接稀釋1000倍加到培養(yǎng)基里就可以了。

培養(yǎng)方式 ^……

一般我是采用透氣T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，剛開(kāi)始細(xì)胞密度比較低的時(shí)候我會(huì)豎著靜置，瓶?jī)?nèi)加入5ml培養(yǎng)基，等個(gè)兩三天觀察一下細(xì)胞密度，如果細(xì)胞密度還可以就正常平放即可。

細(xì)胞傳代 ^……

針對(duì)細(xì)胞傳代，有兩種方式：

1：2-3天可以采取半量換液法，即瓶?jī)?nèi)有5ml培養(yǎng)基，加入5ml培養(yǎng)基混勻，取出5ml放入另一瓶中；

2：每周可以采取一次離心去除上清培養(yǎng)基，加入新鮮培養(yǎng)基，進(jìn)行繼續(xù)培養(yǎng)，如果細(xì)胞不著急用，不需要每天拿出來(lái)觀察。同時(shí)也不需要每天換液，因?yàn)樵摷?xì)胞比較喜歡在酸性環(huán)境生長(zhǎng)，因此待培養(yǎng)基變黃，再去換液或者傳代。

以上便是任老師培養(yǎng)懸浮細(xì)胞THP-1的全部經(jīng)驗(yàn)分享，希望能對(duì)大家有所幫助。我們也歡迎更多老師來(lái)稿，分享您的科研干貨和心得體會(huì)！

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