革蘭氏染色液
【產(chǎn)品用途】
革蘭氏染色液用于細菌革蘭氏染色實驗。
【檢驗原理】
通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后，在細胞壁內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復合物，革蘭氏陽性菌由于其細胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密，故遇乙醇或丙酮脫色處理時，因失水反而使網(wǎng)孔縮小，再加上它不含類脂，故乙醇處理不會出現(xiàn)縫隙，因此，能把結(jié)晶紫與碘復合物牢牢留在壁內(nèi)，使其仍呈紫色；而革蘭氏陰性菌因其細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差，在遇脫色劑后，以類脂為主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結(jié)晶紫與碘復合物的溶出，因此通過乙醇脫色后仍呈無色，再經(jīng)沙黃等紅色染料復染，就使革蘭氏陰性菌呈紅色。
【配方成分】
1、結(jié)晶紫染色液
配方（每瓶） 含量
結(jié)晶紫 0. 1g
95％乙醇 2mL
1％草酸銨水溶液 8mL
2、革蘭氏碘液
配方（每瓶） 含量
碘 0.033g
碘化鉀 0.067g
蒸餾水 10mL
3、脫水酒精
配方（每瓶） 含量
95％乙醇 10mL
4、沙黃復染液
配方（每瓶） 含量
沙黃 0.025g
95％乙醇 1mL
蒸餾水 9mL
【使用方法】
1、將涂片在火焰上固定，滴加結(jié)晶紫染色液。染1min，水洗。
2、用空瓶裝所需的革蘭氏碘液，臨用時滴加革蘭氏碘液，作用1min。水洗。。用剩碘液應及時再裝回棕色玻璃瓶中。
3、滴加脫色酒精，約30s；或?qū)⒚撋凭螡M整個涂片，立即傾去，再用95%酒精滴滿整個涂片，脫色10s。
4、水洗，滴加沙黃復染液，復染1min，水洗，待干，鏡檢。
5、結(jié)果：革蘭氏陽性菌呈紫色，革蘭氏陰性菌呈紅色。
【質(zhì)量控制】
指標 | 質(zhì)控菌株及編號 | 特征性反應 |
特征觀察 | 大腸埃希氏菌 ATCC25922 | 革蘭氏陰性，鏡下呈紅色，短桿狀 |
金黃色葡萄球菌 ATCC6538 | 革蘭氏陽性，鏡下呈紫色，球狀 |
