027100 溴甲酚紫葡萄糖肉湯
(Bromcresol Purple Dextrose Broth)
用 途:
溴甲酚紫葡萄糖肉湯用于培養(yǎng)細(xì)菌和鑒別細(xì)菌發(fā)酵葡萄糖試驗(yàn),還用于低酸性罐頭食品商業(yè)無(wú)菌檢驗(yàn)(GB/T4789.26-2003)。
原 理:
蛋白胨和牛肉膏粉提供碳氮源、維生素和生長(zhǎng)因子;葡萄糖為可發(fā)酵的糖類;氯化鈉維持均衡的滲透壓;溴甲酚紫為pH指示劑。
配方(每升):
蛋白胨 10g
牛肉膏粉 3g
葡萄糖 10g
氯化鈉 5g
溴甲酚紫 0.04g
最終pH7.0±0.2
使用方法:
1、稱取溴甲酚紫葡萄糖肉湯28g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝于帶有小倒管的試管中,121℃滅菌10min。
2、將樣罐(或留樣)用滅菌的適當(dāng)工具移出約1mL(克)內(nèi)容物接種培養(yǎng),接種量約為培養(yǎng)基的十分之一。
3、將溴甲酚紫葡萄糖肉湯管放入培養(yǎng)箱中36±1℃培養(yǎng)96—120h;要求在55℃培養(yǎng)的,在接種前應(yīng)在55℃水浴中預(yù)熱至該溫度,接種后立即放入55℃溫箱培養(yǎng)24—72h。
4、觀察結(jié)果。將接種的培養(yǎng)基管放入規(guī)定溫度的培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)后,每d觀察培養(yǎng)生長(zhǎng)情況。
對(duì)在36±1℃培養(yǎng)有菌生長(zhǎng)的溴甲酚紫肉湯管,觀察產(chǎn)氣情況,并涂片染色鏡檢。如果是含桿菌的混合培養(yǎng)物或球菌、酵母菌或霉菌的純培養(yǎng)物,不再往下檢驗(yàn);如僅有芽孢桿菌則判為嗜溫性需氧芽孢桿菌;如僅有桿菌無(wú)芽孢則為嗜溫性需氧桿菌,如需進(jìn)一步證實(shí)是否是芽孢桿菌,可轉(zhuǎn)接于錳鹽營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板在36±1℃培養(yǎng)后再作判定。
5、對(duì)在55℃培養(yǎng)有菌生長(zhǎng)的溴甲酚紫肉湯管,觀察產(chǎn)酸產(chǎn)氣情況,并涂片染色鏡檢。如有芽孢桿菌,則判為嗜熱性需氧芽孢桿菌;若僅有桿菌而無(wú)芽孢則判為嗜熱性需氧桿菌。如需進(jìn)一步證實(shí)是否芽孢桿菌,可轉(zhuǎn)接于錳鹽營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板,在55℃培養(yǎng)后再作判定。
質(zhì)量控制:
下列菌株接種后于36±1℃培養(yǎng)72h,結(jié)果如下:
貯 存:貯存于避光、陰涼干燥處,用后立即旋緊瓶蓋。貯存期三年。
規(guī) 格:250g
參考文獻(xiàn):
1.GB/T 4789.26-2003 中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn) 罐頭食品商業(yè)無(wú)菌的檢驗(yàn)