中國工程院食品安全院士團(tuán)隊

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耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)和耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(Methicillin-resistant coagulase-negative staphylococci, CoNS)是醫(yī)院環(huán)境中的重要問題。MRSA和CoNS一直是導(dǎo)致衛(wèi)生保健相關(guān)感染的前五大病原體。在一些機(jī)構(gòu)中，25%至50%的金黃色葡萄球菌和高達(dá)75%的金黃色葡萄球菌分離株對甲氧西林（Methicillin）或苯唑西林（Oxacillin）耐藥。這些分離株對目前所有可用的β-內(nèi)酰胺抗菌劑以及β-內(nèi)酰胺/β-內(nèi)酰胺酶抑制劑組合（β-lactam antimicrobials and β-lactam/β-lactamase inhibitor combinations）具有耐藥性，但一些具有抗MRSA活性的新頭孢菌素（Cephalosporins）除外。因此，萬古霉素（Vancomycin）常被用作葡萄球菌感染的經(jīng)驗性治療。因此，正確檢測這些分離株的耐藥性對治療管理至關(guān)重要。頭孢西?。–efoxitin）可用于篩選葡萄球菌mecA介導(dǎo)的耐藥，并且由于提高了檢測mecA介導(dǎo)的耐藥的敏感性和特異性，常被用作苯唑西林在金黃色葡萄球菌（S. aureus）、盧頓葡萄球菌（S. lugdunensis）、表皮葡萄球菌（S. epidermidis）和其他一些葡萄球菌中的替代品。值得注意的是，苯唑西林圓盤試驗（Oxacillin disk testing）只對指定的品種是可靠的，不應(yīng)該用于金黃色葡萄球菌。然而，對于某些葡萄球菌物種，如假中間葡萄球菌（S. pseudintermedius），苯唑西林是耐藥性最可靠的預(yù)測因子。除了傳統(tǒng)的表型抑制測試（Traditional phenotypic inhibitory testing）外，還有其他幾種常規(guī)方法用于檢測和區(qū)分分離細(xì)菌和臨床標(biāo)本中MRSA的存在。顯色培養(yǎng)基（Chromogenic media），比如在MRSA的情況下，選擇頭孢西丁耐藥菌株并根據(jù)菌落的存在和顏色將金黃色葡萄球菌與其他物種區(qū)分開來，經(jīng)常用于MRSA監(jiān)測。當(dāng)從無菌地點分離出肺炎鏈球菌（S. pneumoniae）時，必須進(jìn)行藥敏試驗?？刹捎胦xacillin篩片擴(kuò)散法（Oxacillin screen disk diffusion method），分離物抑菌區(qū)≥20 mm，說明該分離物對青霉素（Penicillin）敏感。此外，在Penicillin篩檢上小于19mm的區(qū)域需要使用MIC方法進(jìn)行額外的測試，因為這種大小的區(qū)域抑制可能出現(xiàn)在對青霉素耐藥、敏感或中間的分離株中。因此，當(dāng)從某一來源(如腦膜炎、血液)獲得分離物時，延遲藥敏試驗可能有潛在危險，直接進(jìn)行MIC檢測可能是最有效的。最低抑菌濃度(The minimum inhibitory concentration，MIC)定義為抗生素在體外抑制生物體可見生長的最低濃度。對于肺炎鏈球菌或腸球菌以外的鏈球菌，需要檢測和報告的抗菌劑取決于種類。只有當(dāng)患者對青霉素過敏并考慮用大環(huán)內(nèi)酯類藥物/利可沙胺治療時才需要進(jìn)行檢測，因為B群鏈球菌引起的感染已顯示對克林霉素（Clindamycin）有40%的耐藥性，對紅霉素（Erythromycin）有50%的耐藥性。對紅霉素耐藥但對克林霉素敏感的分離株應(yīng)檢測由erm基因介導(dǎo)的克林霉素“誘導(dǎo)性”耐藥，使用微量肉湯稀釋（Broth microdilution or the ）或D區(qū)近似試驗（D-zone approximation test）。只報告克林霉素的結(jié)果?！罢T導(dǎo)型”克林霉素耐藥也可發(fā)生在葡萄球菌、β溶血性鏈球菌和肺炎鏈球菌中。不同地理區(qū)域的患病率可能不同。對于綠鏈球菌（viridans streptococci），任何從無菌身體部位分離出來并涉及嚴(yán)重感染(如心內(nèi)膜炎或敗血癥)的分離株，都應(yīng)檢測青霉素或氨芐西林（Ampicillin）的敏感性。青霉素和氨芐西林?jǐn)U散試驗的解釋標(biāo)準(zhǔn)不適用于翠綠鏈球菌，因為該方法是不可靠的病原體-抗菌藥物組合。因此，使用MIC方法輔助完成測試。翠綠鏈球菌是重要的致病菌，可引起中性粒細(xì)胞減少癥和先天性瓣膜心內(nèi)膜炎患者的膿毒癥。表型法——包括肉湯稀釋（Broth dilution）、瓊脂稀釋（Agar dilution）、圓盤擴(kuò)散（Disk diffusion）和梯度擴(kuò)散（Gradient diffusion）——是目前最普遍的，在許多情況下也是最經(jīng)濟(jì)有效的完成藥敏試驗的方法?；诒硇头椒ǖ纳虡I(yè)操作系統(tǒng)減少了檢測抗生素耐藥性表達(dá)所需的勞動和時間，并在許多實驗室中使用。最后，更新的檢測方法，如分子檢測，其中一些可以直接在患者標(biāo)本上進(jìn)行，由于它們消除了與病原體分離相關(guān)的延遲，已與常規(guī)檢測相結(jié)合。

Figure 1. Disk induction （derived from McPherson, R. A., & Pincus, M. R. 2021）

參考文獻(xiàn)：McPherson, R. A., & Pincus, M. R. (2021). Henry's clinical diagnosis and management by laboratory methods E-book. Elsevier Health Sciences.

來源：微生物安全與健康網(wǎng)，作者~蘇悅