DMEM高糖、DMEM低糖、DMEM/F-12培養(yǎng)基到底啥差別？
發(fā)布時間：2023-04-04 瀏覽次數(shù)：197
DMEM高糖培養(yǎng)基
DMEM高糖培養(yǎng)基是在MEM培養(yǎng)基基礎(chǔ)上改良而來，目前已廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞的培養(yǎng)。DMEM高糖培養(yǎng)基普遍應(yīng)用于生長快、粘附性低的細(xì)胞?？捎糜诙喾N哺乳動物原代細(xì)胞的培養(yǎng)，例如原代成纖維細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞、HUVEC、平滑肌細(xì)胞等，也可以用于一些細(xì)胞系的培養(yǎng)，例如Hela、293、Cos-7及PC-12等。
DMEM低糖培養(yǎng)基
DMEM低糖培養(yǎng)基是一種應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基，可用于許多哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)。DMEM低糖培養(yǎng)基適合代謝作用慢、依賴性貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。
DMEM/F-12培養(yǎng)基
DMEM/F-12培養(yǎng)基是將DMEM與Ham's F-12培養(yǎng)基以1：1比例混合改良而來的。改良得到的DMEM/F-12培養(yǎng)基，營養(yǎng)成分更為豐富，含有更多種微量元素，廣泛應(yīng)用于多種哺乳類細(xì)胞的培養(yǎng)，也適用于低血清含量下哺乳動物細(xì)胞的培養(yǎng)以及克隆密度培養(yǎng)。已在DMEM/F-12之中成功培養(yǎng)的細(xì)胞包括MDCK、膠質(zhì)細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、人內(nèi)皮細(xì)胞及小鼠成纖維細(xì)胞。
DMEM高糖與DMEM低糖的區(qū)別
低糖DMEM適合用于培養(yǎng)代謝作用較慢的細(xì)胞，高糖DMEM可以為細(xì)胞提供充足的碳源，適用于代謝快的細(xì)胞，如胚胎干細(xì)胞 (ES細(xì)胞) 等。同時，低糖的培養(yǎng)基有助于維持細(xì)胞的低分化狀態(tài)，高糖培養(yǎng)基有助于細(xì)胞分化。此外，做單抗細(xì)胞融合時，一般也使用低糖培養(yǎng)基，因為高糖使細(xì)胞生長過快，不利于融合細(xì)胞的染色體穩(wěn)定。
知識延伸：培養(yǎng)基添加物的作用
L-谷氨酰胺：L-谷氨酰胺在細(xì)胞培養(yǎng)時是重要的。脫掉氨基后，L-谷氨酰胺可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來源、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺在溶液中經(jīng)過一段時間后會降解，但是確切的降解率一直沒有最終確定。L-谷氨酰胺的降解導(dǎo)致氨的形成，而氨對于一些細(xì)胞具有毒性。
GlutaMAX-I：即L-丙氨酰-L-谷氨酰胺，是 L-谷氨酰胺的衍生物，可替代細(xì)胞培養(yǎng)基中等摩爾的L-谷氨酰胺。該物質(zhì)在水溶液中十分穩(wěn)定，不會自發(fā)降解，而是通過細(xì)胞分泌的一種肽酶緩慢降解以釋放谷氨酰胺，再被細(xì)胞吸收利用。
HEPES：HEPES 是一種優(yōu)良的生物緩沖劑，對細(xì)胞無毒性作用，添加 HEPES 的培養(yǎng)基能夠較長時間保持恒定的 pH 范圍，可以有效地防止培養(yǎng)液 pH 波動較大對細(xì)胞生長產(chǎn)生不利的影響。一般進(jìn)行克隆化培養(yǎng)時要添加HEPES。
酚紅：酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為 pH 值的指示劑：中性時為紅色，酸性時為黃色，堿性時為紫色。研究表明，酚紅可以模擬固醇類激素的作用（特別是雌激素）。為避免固醇類反應(yīng)，培養(yǎng)細(xì)胞，尤其是哺乳類細(xì)胞時，用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測，一些研究人員在做流式細(xì)胞檢測時，不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
丙酮酸鈉：丙酮酸鈉可以作為細(xì)胞培養(yǎng)中的替代碳源。盡管細(xì)胞更傾向于以葡萄糖作為碳源，但是，如果沒有葡萄糖的話，細(xì)胞也可以代謝丙酮酸鈉。
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