血清選購和使用注意事項
發(fā)布時間:2023-02-15 瀏覽次數:305
聊聊血清選購和使用注意事項
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Part 01 牛血清分類
胎牛血清FBS,母牛懷孕3-8個月時采血
新生牛血清NCS, 出生10天內
小牛血清BCS,出生后 16-22周
供體血清 成年牛。
Part 02 外觀辨別牛血清品質
血清為動物來源,成分復雜,不同批次間會存在一些外觀上差別。一般情況下,它們的顏色可能是金黃色、紅色、琥珀棕色或者是介于三者之間。
淡黃色/透明:2小時內國產新生牛血清,膽紅素含量較少
金黃色/透明:新生牛血清
金黃色/不透明:數天或更久小牛血清
淡黃色微紅/透明:進口胎牛血清,如澳洲
淡紅色/透明或紅色偏深/透明:普通進口胎牛血清,如南美
紅色偏暗/透明——普通胎牛血清;保存不好,出現血紅蛋白氧化
紅色/不透明:進口小牛血清,透明度越差牛齡越大。
Part 03 牛血清的保存及使用
-15℃至-20℃保存。為避免反復凍融,建議無菌分裝成一次的用量,-20℃保存,效期內均可使用;
2℃-8℃融化,過程中不時旋轉混勻,充分融解后使用或平衡至室溫使用,盡快使用完。
出現絮狀沉淀,最常見原因之一:融化過程中,各種蛋白如脂蛋白等聚集;一般不會影響產品質量。可400g離心5分鐘,取上清,然后過濾。根據需要選擇合適的濾膜孔徑,常用0.22um PES材質濾膜。為避免阻塞濾膜,建議離心取上清,加入培養(yǎng)基內一起過濾,不要直接過濾血清。
所以建議分裝成一次性用量,避免反復凍融。
Part 04 血清是否需滅活或者輻照處理?
滅活過程,會破壞某些成分,如氨基酸,維生素,生長因子等。所以只有特殊要求,會考慮對血清做滅活處理;如實驗對血清某種組分敏感,常見需去除補體蛋白,一般免疫學相關研究中及肌細胞和干細胞培養(yǎng)中,需對血清進行滅活處理。
融化混勻后,置于56℃水浴30min熱滅活,同時不時旋轉混勻血清,30min后建議馬上轉移至冰上降溫。為減少對血清品質影響,一次滅活量不宜過大。
γ射線輻照是滅活血清中病毒,一般情況下,25-40kGy和30-45kGy是常用輻射劑量。
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