科普講堂 | 認(rèn)識胎牛血清
發(fā)布時間:2023-02-10 瀏覽次數(shù):410
01 什么是胎牛血清?
胎牛血清(fetal bovine serum,F(xiàn)BS)指通過對未出生的胎牛行穿刺采血,再經(jīng)自然層析、離心、三級0.1μm微濾等處理而得到的上清液。
02 胎牛血清的生產(chǎn)流程
首先甄選符合要求的高質(zhì)量的供體,將胎牛從母體內(nèi)取出,對胎牛進行穿刺取血,采血過程中要保證無菌操作,且紅細(xì)胞不可破裂過多,影響血清質(zhì)量。接下來冷凍離心,收集血清,凍存,血清解凍后進行0.1um三次過濾,避免病原微生物的污染,此過程之后會對血清進行質(zhì)檢和定級,最后全程冷鏈保存和運輸。
03 胎牛血清的主要成分
①各種蛋白:白蛋白、球蛋白、纖連蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白等;
②因子:各種生長因子等;
③各種激素:胰島素、促生長激素、氫化可的松等;
④其他微量元素、維生素、離子等;
⑤不明確的成分:由于胎牛血清是天然生物制品,F(xiàn)BS中還存在部分不明確的生物成分。
04 胎牛血清的主要功能
① 提供營養(yǎng):胎牛血清中的各種蛋白可提供細(xì)胞分裂所需的營養(yǎng)物質(zhì)
② 促進生長:胎牛血清中的各種生長因子和激素可促進細(xì)胞生長
③ 保護細(xì)胞:胎牛血清帶有一定粘稠度,且有酸堿緩沖液的作用,可保護細(xì)胞
④ 提供蛋白酶抑制劑:提供蛋白酶抑制劑,中和剩余的胰蛋白酶的消化,保護細(xì)胞
⑤ 提供貼壁因子:胎牛血清提供貼壁因子,是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子的來源。
05 胎牛血清使用要點
①正確地儲存:胎牛血清應(yīng)在-20°C長期保存,如在4℃保存,不應(yīng)超過1個月。在使用時注意分裝使用。避免反復(fù)凍融。
② 正確地解凍:可在4℃冰箱過夜解凍。推薦使用血清融化三步法:即將500ml血清在室溫下放置1.5h,20℃水浴25min,37℃ 水浴35min。
③正確地使用:配制完全培養(yǎng)基盡可能“現(xiàn)用現(xiàn)配”,并于一周內(nèi)用完。避免胎牛血清在37°C靜置過久。