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“細(xì)菌偵探”出動(dòng):高效檢測三大病原菌

發(fā)布時(shí)間:2024-10-08      瀏覽次數(shù):308    分享:

9月29日,最高人民法院發(fā)布涉產(chǎn)品質(zhì)量典型案例,包括謝某生產(chǎn)、銷售不符合安全標(biāo)準(zhǔn)的食品案獲刑1年的案例。謝某因烤鴨店食品滋生細(xì)菌及食材過期,導(dǎo)致多人食物中毒。經(jīng)檢驗(yàn),在當(dāng)天抽檢的 40 份單品中,11批次涼菜檢測出“大腸菌群”“金黃色葡萄球菌”,17 批次“金黃色萄球菌”超出標(biāo)準(zhǔn)限值,雞翅、烤鴨亞硝酸鹽嚴(yán)重超標(biāo)。

食物中的細(xì)菌污染一直是一個(gè)讓人頭疼的食品安全問題。別看這些細(xì)菌個(gè)頭小,但它們可是能引起嚴(yán)重食物中毒的“壞家伙”。為了對(duì)抗這些“隱形敵人”,科學(xué)家們可是絞盡腦汁,想出了各種辦法。今天,我們就來看看一項(xiàng)最新的研究,看看科學(xué)家們是如何用一種高效、靈敏的檢測方法來同時(shí)檢測燕窩、阿膠和枸杞中的三種常見細(xì)菌——沙門氏菌、大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的。

這項(xiàng)研究的主要目的是開發(fā)一種高效、靈敏、特異性強(qiáng)且操作簡單的多重實(shí)時(shí)定量PCR(mRT-qPCR)方法,用于同時(shí)檢測燕窩、阿膠和枸杞中的活沙門氏菌、大腸桿菌和金黃色葡萄球菌。研究人員設(shè)計(jì)了針對(duì)目標(biāo)基因invA、uidA和nuc的引物和探針,并通過丙啶單疊氮化物(PMA)處理排除死細(xì)菌的遺傳物質(zhì),從而只檢測活細(xì)菌。

研究方法

研究人員選用了幾種不同的食品樣本,包括燕窩、阿膠和枸杞。實(shí)驗(yàn)分為幾個(gè)步驟:首先,研究人員將食品樣本進(jìn)行均質(zhì)化處理,然后加入適量的細(xì)菌懸浮液,模擬實(shí)際污染情況;接著,樣本經(jīng)過PMA處理,以排除死細(xì)菌的遺傳物質(zhì);再然后,研究人員從處理后的樣本中提取DNA,確保只提取到活細(xì)菌的DNA;最后,研究人員設(shè)計(jì)了針對(duì)沙門氏菌、大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的特異性引物和探針,通過mRT-qPCR方法,研究人員能夠同時(shí)檢測這三種細(xì)菌的存在,并且能夠區(qū)分活細(xì)菌和死細(xì)菌。


研究結(jié)論

經(jīng)過多次試驗(yàn),研究人員得出了以下結(jié)論:
1、高效性:這種方法能夠在短時(shí)間內(nèi)同時(shí)檢測出三種細(xì)菌,檢測效率高;
2、靈敏性:這種方法能夠檢測到低至10^2 CFU/ml的沙門氏菌和大腸桿菌,以及10^1 CFU/ml的金黃色葡萄球菌;
3、特異性:這種方法能夠特異性地檢測目標(biāo)細(xì)菌,不會(huì)受到其他非目標(biāo)細(xì)菌的干擾;
4、可靠性:通過PMA處理,這種方法能夠可靠地區(qū)分活細(xì)菌和死細(xì)菌,回收率在95.7%到105.6%之間。

這項(xiàng)研究表明,PMA結(jié)合mRT-qPCR技術(shù)是一種高效、靈敏、特異性強(qiáng)且操作簡單的方法,適用于同時(shí)檢測食品中的多種病原菌。未來,科學(xué)家們可以繼續(xù)優(yōu)化這種方法,進(jìn)一步提高其檢測效率和靈敏度。此外,這種方法還可以應(yīng)用于其他食品和藥品的微生物檢測,為食品安全提供更有力的保障。

參考文獻(xiàn):Liang, Taobo,Long, Hui,Zhan, Zhongxu,et al.Simultaneous detection of viable Salmonella spp., Escherichia coli, and Staphylococcus aureus in bird's nest, donkey-hide gelatin, and wolfberry using PMA with multiplex real-time quantitative PCR[J].FOOD SCIENCE & NUTRITION,2022,10(9):3165-3174.

來源:微生物安全與健康網(wǎng),作者~凌紀(jì)云。