應(yīng)對食品中大腸桿菌超標(biāo)的的新檢測方法
發(fā)布時間：2024-12-11 瀏覽次數(shù)：260
大腸桿菌含量竟超標(biāo) 290 倍?食品安全問題不容忽視。據(jù)測評博主"老爸評測”發(fā)布的檢測報告，紫燕百味雞的夫妻肺片和香辣鴨脖等產(chǎn)品被檢出大腸菌群嚴(yán)重超標(biāo)，其中最高超標(biāo)達(dá) 290 倍。大腸桿菌作為一種條件致病菌，在特定條件下可能引發(fā)人和多種動物的胃腸道感染等疾病。大腸桿菌（Escherichia coli，簡稱E. coli）是一種常見的革蘭氏陰性細(xì)菌，廣泛存在于人類和動物的腸道中。盡管大多數(shù)大腸桿菌菌株是無害的，但某些致病菌株可以引起嚴(yán)重的食源性疾病。水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中，貝類如貽貝（mussels）常常受到大腸桿菌污染，導(dǎo)致食品安全問題。因此，快速、準(zhǔn)確地檢測和定量大腸桿菌對于保障食品安全至關(guān)重要。
2024年在《Aquaculture》期刊上題為《Rapid, DNA extraction-free, detection and quantification of Escherichia coli in mussels by Most Probable Number colorimetric Loop-mediated isothermal amplification》的研究開發(fā)了一種無需DNA提取的快速檢測和定量貽貝中大腸桿菌的方法。該方法結(jié)合了最可能數(shù)（Most Probable Number，MPN）和比色環(huán)介導(dǎo)等溫擴(kuò)增（colorimetric Loop-mediated isothermal amplification，LAMP）技術(shù)，能夠在短時間內(nèi)提供準(zhǔn)確的檢測結(jié)果。
圖源：https://doi.org/10.1016/j.aquaculture.2024.741873
研究具體所用的方法
1、樣品準(zhǔn)備：從市場上購買新鮮貽貝，取其軟體部分進(jìn)行均質(zhì)化處理，制備樣品懸液。
2、MPN法：將樣品懸液進(jìn)行系列稀釋，每個稀釋度的樣品分別接種到含有選擇性培養(yǎng)基的試管中，培養(yǎng)24小時后觀察并記錄陽性反應(yīng)的試管數(shù)目。
3、LAMP法：從陽性反應(yīng)的試管中取樣，直接進(jìn)行LAMP反應(yīng)。LAMP反應(yīng)體系中加入比色指示劑，通過顏色變化判斷反應(yīng)結(jié)果。整個過程無需進(jìn)行DNA提取，簡化了操作步驟。
4 、數(shù)據(jù)分析：根據(jù)MPN法的統(tǒng)計原理，結(jié)合LAMP法的檢測結(jié)果，計算樣品中大腸桿菌的濃度。
研究的結(jié)論：研究結(jié)果表明，結(jié)合MPN和LAMP技術(shù)的方法能夠在短時間內(nèi)（約2小時）準(zhǔn)確檢測和定量貽貝中的大腸桿菌。該方法具有操作簡便、靈敏度高、特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，適用于現(xiàn)場快速檢測。與傳統(tǒng)的培養(yǎng)法相比，該方法顯著縮短了檢測時間，提高了檢測效率。
啟發(fā)
本研究為水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中大腸桿菌的快速檢測提供了一種新的思路和方法。其他科研者可以借鑒這種結(jié)合MPN和LAMP技術(shù)的方法，應(yīng)用于其他類型的食品安全檢測中。此外，該方法的無DNA提取步驟也為簡化其他微生物檢測提供了參考。
對于非本領(lǐng)域的科研工作者，本研究展示了如何通過創(chuàng)新的技術(shù)組合，解決實(shí)際問題。讀者可以從中了解到比色LAMP技術(shù)的原理和應(yīng)用，以及如何通過簡化操作步驟，提高檢測效率。這種跨學(xué)科的研究方法和思維方式，對于推動科學(xué)研究和技術(shù)應(yīng)用具有重要意義。
參考文獻(xiàn)：https://doi.org/10.1016/j.aquaculture.2024.741873
來源：微生物安全與健康網(wǎng)，作者~凌紀(jì)云。
