活的諾如病毒在水微觀世界中的持久性
發(fā)布時(shí)間：2024-11-15 瀏覽次數(shù)：378
人類諾如病毒是全球急性胃腸炎的主要原因之一。由于人類諾如病毒在實(shí)驗(yàn)室中基本上無法培養(yǎng)，目前評(píng)估諾如病毒環(huán)境歸宿的方法依賴于使用可培養(yǎng)的替代病毒和分子方法。這些方法本質(zhì)上是保守的，因?yàn)樗鼈兡軝z測到?jīng)]有傳染性的受損病毒顆粒。而人腸道類腸桿菌（HIE）是一種新興的細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)，能夠擴(kuò)增活的諾如病毒，Marlee Shaffer等人首次利用HIE測定來評(píng)估活的諾如病毒和諾如病毒 RNA 在表面、水龍頭和去離子水微觀世界中的持久性，與傳統(tǒng)分子方法進(jìn)行比較。發(fā)現(xiàn)分子方法進(jìn)行的當(dāng)前環(huán)境諾如病毒檢測與通過 HIE 測定評(píng)估的活力之間存在脫節(jié)，分子監(jiān)測并不代表傳染性諾如病毒。
材料和方法
所有水樣（超純水、自來水和地表水）均在圣母大學(xué)采集。超純水和自來水均從相關(guān)實(shí)驗(yàn)室用水系統(tǒng)中無菌取樣。HIEs 來源于 Lgr5+ 成體腸道干細(xì)胞。分別用GII.4 Sydney[P31] 陽性糞便濾液感染水樣和3天后分化好的HIE細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)共進(jìn)行28天。其中衰變率k：
。Nt 是時(shí)間 t 的基因組拷貝，N0 是時(shí)間 0 的基因組拷貝，k 是衰減率，t 是時(shí)間（以分鐘為單位）。
結(jié)果：如圖1顯示，HIE檢測在28天內(nèi)，擴(kuò)增的諾如病毒 RNA 信號(hào)持續(xù)下降，活的諾如病毒在自來水和去離子水微觀世界中降至檢測限以下。而在實(shí)驗(yàn)期間，通過 RT-qPCR 測量的 RNA 未觀察到明顯的 RNA 衰變。
圖1 HIE 與水樣中的 RNA 持久性。來源自參考文獻(xiàn)
通過 HIE 測定對(duì)于地表水、自來水和超純水活諾如病毒的推定衰變率分別為 0.11 ± 0.02 天 - 1、0.08 ± 0.02 天 - 1、0.10 ± 0.01 天 - 1 ，不同水類型的 k 值之間沒有顯著差異。
參考文獻(xiàn)：Shaffer M, Huynh K, Costantini V, Bibby K, Vinjé J. Viable Norovirus Persistence in Water Microcosms. Environ Sci Technol Lett. 2022;9(10):851-855. doi:10.1021/acs.estlett.2c00553
來源：微生物安全與健康網(wǎng)，作者~徐穎歡。
