中國工程院食品安全院士團隊

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移液槍是實驗室中常用的精確測量和轉(zhuǎn)移液體的工具，正確使用移液槍不僅關(guān)系到實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，還關(guān)系到實驗人員的安全。因此，掌握移液槍的正確使用方法和注意事項至關(guān)重要。您知道嗎，如果只是簡單地遵從接下來這些技巧，您移液的準(zhǔn)確性和重復(fù)性將可能會得到5%的提高。

1.最優(yōu)的量程范圍

大多數(shù)移液器的正常操作體積范圍是指示量程的（10-100）%。盡管這一范圍是可操作范圍，但隨著體積設(shè)定的下降性能參數(shù)將會發(fā)生變化。

100uL移液器的準(zhǔn)確性參數(shù)在指示量程的50-100%的時為±0.8%。然而如果你移取10μL(或者指示量程的10%)，不準(zhǔn)確度將會提高3倍，或者為（2.5-3）%。

所以獲得最佳性能的最優(yōu)量程范圍是指示量程的35-100%。盡量避免將一個移液器的體積設(shè)定少于最大體積的10%，而應(yīng)該用小量程的移液器來進行小體積移液操作。

2.吸頭浸入深度

正確的吸頭浸入深度可以提高準(zhǔn)確性高達(dá)5%，尤其對微量移液器相當(dāng)重要。對于微量移液器，吸頭應(yīng)該浸入（1-2）mm，而對于大量程的移液器，浸入深度應(yīng)為（6-10）mm。

如果吸頭浸入的太深，吸頭內(nèi)部的空氣就會被壓縮，造成過多的液體被吸入。殘留在吸頭表面的液體也可能會影響結(jié)果。

吸頭如果浸入的不夠充分，那么可能會吸入空氣，就會造成氣泡的形成和移取體積不準(zhǔn)。兩者都會造成不準(zhǔn)確的移液體積，

3.正確的吸液角度

吸液時吸頭盡可能以90度角浸入到樣品中，最好不要偏離垂直位置超過20°對于微量體積的移液器，以垂直角度移取溶液可以提高2.5%的準(zhǔn)確性。

偏離垂直超過20°吸液將會導(dǎo)致不準(zhǔn)確的量取-過多的液體將會被吸入，造成移液不準(zhǔn)確。以60度角浸入，將會使你的液體吸取量超過所設(shè)定的0.7%。

4.保持一致性

保持一致的移液節(jié)奏和速度將會幫助你得到理想的、重復(fù)性更高的結(jié)果。保持節(jié)奏和速度的一致性可以將準(zhǔn)確性提高5%。

保持一致的樣品分配、一致的樣品排液

注意區(qū)分潤洗吸頭和不適合潤洗的情況

潤洗吸頭2-3次可以在吸頭內(nèi)形成同質(zhì)膜，這樣可以提高0.2%的準(zhǔn)確度性。

潤洗可以中和微量移液中的毛細(xì)效應(yīng)，對于大體積移液，這可以使吸頭內(nèi)部溫度與樣品溫度一致。

當(dāng)移取熱的和冷的溶液時潤洗會對結(jié)果產(chǎn)生不利影響，如從冰浴中移液或者溶液溫度超過37攝氏度，潤洗可能會造成高達(dá)5%的錯誤率。

5.避免溫度變化

恒定的室溫：移液和校準(zhǔn)的理想溫度是21.5℃±1℃。避免在有風(fēng)或者有陽光直射，溫度變化較大的區(qū)域操作，這些區(qū)域可能會降低移液的精準(zhǔn)度。

保證足夠的平衡時間:除非另有其他要求，否則請保證足夠的時間來使您的液體樣品和移液器達(dá)到平衡溫度。

手溫效應(yīng)長時間使用移液器，來自手的熱量可能會加熱移液器一導(dǎo)致移液器內(nèi)部的空氣受熱膨脹從而會產(chǎn)生不準(zhǔn)確的結(jié)果。

圖    移液槍的使用方法

6.移液槍的校準(zhǔn)方法

6.1.準(zhǔn)備超純水、萬分之一天平(如果校正 0.5~2.5ul量程的，至少要十萬分之的天平)、溫濕度計、恒溫室，還需準(zhǔn)備一個小口容器，防止水分揮發(fā)。

6.2.按移液器總量程的 100%、50%、10%分別進行第三和第四步。

6.3.吸頭要反復(fù)吸取超純水三次后，吸取固定容積的超純水，推入放置在天平上的小口容器中，待數(shù)據(jù)穩(wěn)定讀取天平數(shù)值，同時記錄溫度。重復(fù) 10次。

6.4.將測量的數(shù)據(jù)用 ISO8655 中的計算公式計算獲得對應(yīng)溫度下的體積，取平均值。

6.5.根據(jù)三個測量點的偏差，用移液器專用的校正扳手通過移液器的校正窗進行調(diào)整。

6.6.重復(fù) 3、4 步，直至偏差在 ISO8655 的要求內(nèi)為止。

7.移液槍維護和保養(yǎng)

如不使用，要把移液槍的量程調(diào)至最大值的刻度，使彈簧處于松弛狀態(tài)以保護彈簧。

最好定期清洗移液槍，可以用肥皂水或60%的異丙醇，再用蒸餾水清洗，自然晾干。

高溫消毒之前，要確保移液器能適應(yīng)高溫。

校準(zhǔn)是可以在20-25度環(huán)境中，通過重復(fù)幾次秤量蒸餾水的方法來進行

使用時要檢查是否有漏液現(xiàn)象。方法時吸取液體后懸空垂直放置幾秒中，方法時吸取液體后懸空垂直放置幾秒中，看看液面是否下降。

如今全自動儀器的推進，移液槍使用的頻率越來越少了，習(xí)慣了機器自動加樣，反而導(dǎo)致一部分人不會正確使用傳統(tǒng)移液槍，但是移液槍在轉(zhuǎn)移標(biāo)本或者質(zhì)控品的時候，又不能沒有。本文詳細(xì)介紹了移液過程中的如何提高精度，比如做BCA項目，潤洗槍頭和不潤洗差距很大，看完本篇文章，你應(yīng)該會了吧？

來源：環(huán)凱轉(zhuǎn)載于“ 洞見IVD”公眾號，原作者~“DJ.IVD”，內(nèi)容版權(quán)歸原作者所有；
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