中國工程院食品安全院士團隊

科研成果轉(zhuǎn)化平臺

　　【產(chǎn)品名稱】

    大腸桿菌O157:H7顯色培養(yǎng)基

　　(Chromogenic E.coli O157:H7 Agar)

　　【產(chǎn)品用途】

　　用于大腸桿菌O157:H7的快速分離和鑒定。(SN/T 1827-2006)

　　【檢驗原理】

　　蛋白胨提供碳源和氮源;膽鹽抑制革蘭氏陽性菌的生長;氯化鈉可維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑;混合碳水化合物為可發(fā)酵的糖類;中性紅是pH指示劑，細(xì)菌發(fā)酵糖產(chǎn)酸時菌落呈桃紅色;亞碲酸鉀抑制非大腸桿菌O157:H7菌的生長;混合色素與大腸桿菌O157:H7所具有的酶發(fā)生特異性反應(yīng)，水解底物，釋放出顯色基團，在淺紅色平板上產(chǎn)生藍(lán)綠色的菌落。

　　【配方】

   大腸桿菌O157:H7顯色培養(yǎng)基

　　配方(每升)：

　　蛋白胨                   8.6g

　　氯化鈉                   5g

　　混合碳水化合物 　　　　　 25g

　　中性紅 　　　　　　　　　 0.015g

　　膽鹽                     1.5g

　　混合色素 　　　　　　　　 0.3g

　　瓊脂                     15g

　　最終pH                   7.0±0.2

　 【使用方法】

　　1、稱取本品55.4g，加入蒸餾水或去離子水1000毫升，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝三角瓶。

　　2、待基礎(chǔ)培養(yǎng)基冷至50℃時，每100毫升培養(yǎng)基加入1瓶(SR0200)無菌亞碲酸鉀溶液1mL，如樣品中含有較多的變型桿菌，可添加0.0025mg頭孢克肟至100毫升培養(yǎng)基中，混勻并傾注滅菌培養(yǎng)皿，凝固后備用。

　　3、按國家標(biāo)準(zhǔn)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液，用接種環(huán)取1環(huán)增菌液，劃線接種于顯色平板上，置于36±1℃培養(yǎng)18-24小時。

　　4、觀察結(jié)果。挑取大腸桿菌O157:H7顯色培養(yǎng)基平板上呈藍(lán)綠色，扁平透明，邊緣光滑，直徑約2mm的可疑菌落進(jìn)行進(jìn)一步的試驗。

　　5、對疑似大腸桿菌O157:H7菌落可使用MicrogenTMGN-ID或API20E或生化管試驗和O157:H7菌血清學(xué)試驗。

　　【質(zhì)量控制】

　　大腸桿菌O157:H7顯色培養(yǎng)基傾注平皿后呈淺紅色，下列菌株接種后36±1℃培養(yǎng)18-24小時生長情況如下表:

　　貯 存：貯存于避光、陰涼干燥處，用后立即旋緊瓶蓋。貯存期二年。

　　規(guī) 格：可配置1L的培養(yǎng)基干粉。